等電聚焦電泳槽在檢測品種純度時的注意事項
近年來,等電聚焦技術有了新的發(fā)展,成為一門成熟的生化實驗技術。在糧食檢測中,科研人員常會利用等電聚焦電泳槽測定小麥種子純度,具有省時省工、準確性高等特點,是一種能夠替代傳統(tǒng)的田間種植鑒定純度的方法。
我們知道,品種純度是農作物種子質量指標中的最關鍵的一項,是對種子質量進行分級的重要指標。它包括了品種真實性和品種純度兩個概念。目前,品種純度檢測方法有很多,其中等電聚焦電泳槽檢測法是目前比較適用且效率較高的一種方法。在使用儀器過程中,需要嚴格按照注意事項進行。
① 等電聚焦電泳槽要放置在相對干燥的房間內,要遠離水源;
② 注意電聚焦電泳使用的為高電壓,要注意安全;
③ 輸出電極的連接,正負級要絕對正確,膠的加樣端要放在負極端,否則電泳會往反向跑;
④ 穩(wěn)流狀態(tài)下,輸出電極連線不能與電泳槽脫離連接,否則電泳儀 內部會產生極高的電壓,會燒毀電泳儀;
⑤ 穩(wěn)壓狀態(tài)下,輸出電極連線之間不能短路,否則電泳儀內部會產生極高的電流,會燒毀電泳儀;
⑥ 樣品及電泳緩沖液加足,并且電極連接準確,然后方可通電;電泳時關好上蓋,否則電泳不會進行;
⑦ 因等電聚焦電泳會產生高熱,電泳槽需要冷凝散熱,則注意冷凝管內不要有氣泡,配超級恒溫水浴時,注意水管的輸入、輸出口;
⑧ 電聚焦電泳槽配有水平調節(jié)腿,電泳時,注意電泳槽的水平;
⑨ 灌膠時要絕對防止有氣泡產生,如有要用用膠片制成的鉤子,將氣泡勾出去,否 則將直接影響跑膠效果;
⑩ 電泳完后,及時清理電泳槽,不要使緩沖液在電泳槽內長時間存放,造成緩沖液 結晶,制使白金絲導電不佳,過后清理電泳槽造成白金絲折斷,使電泳槽報廢。