玉米葉綠素含量的快速測(cè)定
來源: http://www.52lvi.cn/ 類別:實(shí)用技術(shù) 更新時(shí)間:2011-02-24 閱讀次
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玉米葉綠素含量的快速測(cè)定
葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素,必不可少。葉綠素含量的測(cè)定是實(shí)驗(yàn)室的重要項(xiàng)目之一,如采用化學(xué)方法Arnon法,分光光度計(jì)法,葉綠素測(cè)量?jī)x等,不一而足。迄今為止,在實(shí)際應(yīng)用中,我們通常采用葉綠素檢測(cè)儀,因?yàn)槠浞奖憧旖荩揖_度高,方便攜帶。受到廣泛農(nóng)業(yè)工作者、科研院所的青睞。
分光光度計(jì)法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠,但是在測(cè)定時(shí)需要損傷葉片和組織,不利于對(duì)植株的系統(tǒng)研究。葉色值反映了植物葉片的綠色程度,與葉綠素含量存在一定的相關(guān)性。葉綠素測(cè)量?jī)x是一種專門用于測(cè)定植物葉綠素含量的儀器,該儀器有多家廠商生產(chǎn)銷售,其中以日本柯尼卡美能達(dá)公司的SPAD-502最為高端和暢銷。托普儀器作為日本柯尼卡美能達(dá)公司的特約一級(jí)代理商,也提供葉綠素測(cè)量?jī)x的銷售工作。葉綠素測(cè)量?jī)x的測(cè)定原理是:測(cè)量葉子在紅色區(qū)域和近紅外區(qū)域的吸收率。通過這兩部分區(qū)域的吸收率,來計(jì)算出一種SPAD值,它是用數(shù)字來表示目前和葉子中葉綠素含量相對(duì)應(yīng)的參數(shù)。因?yàn)槿~綠素在藍(lán)色區(qū)域(400—500nm)和紅色區(qū)域(600—700nm)范圍內(nèi)吸收達(dá)到了峰值,但在近紅外區(qū)域卻沒有吸收。另外,葉綠素測(cè)量?jī)x還具有反應(yīng)氮元素含量的作用。
玉米葉綠素含量的測(cè)定有兩種方法。葉綠素計(jì)法:利用日本產(chǎn)的SPAD-502葉綠素含量測(cè)定儀于花期對(duì)玉米功能葉片中部進(jìn)行活體測(cè)定。每個(gè)材料取3個(gè)葉片,最后求平均值。分光光度計(jì)法:將葉綠素計(jì)法測(cè)定完的葉片取回進(jìn)行分光光度計(jì)法測(cè)定。用毛刷刷去表面雜質(zhì),用水沖洗,擦干,備用。每個(gè)葉片在中部用直徑9mm打孔器打孔,取6個(gè)圓形葉片,稱重后放于15mL試管,用10mL95%乙醇避光浸泡96h,浸泡過程中每天混勻2次,葉片完全變白后進(jìn)行比色,于665、649、470nm波長(zhǎng)測(cè)量光密度值,計(jì)算葉綠素含量,取3個(gè)葉片的平均值作為該材料的含量值。計(jì)算公式為:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。
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