葉綠素含量測(cè)定儀的工作原理解析
在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,葉片中的葉綠素含量對(duì)于作物的生長(zhǎng)至關(guān)重要,因此為了更好的進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn),人們開(kāi)始使用葉綠素含量測(cè)定儀來(lái)測(cè)定作物葉片中的葉綠素含量,希望以此為依據(jù),來(lái)科學(xué)指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)工作的開(kāi)展。
葉綠素測(cè)定儀測(cè)定葉綠素含量的方法,相對(duì)來(lái)說(shuō),是一項(xiàng)較為復(fù)雜的過(guò)程,設(shè)計(jì)到的內(nèi)容也比較多,它的工作原理是根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收,利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度。根據(jù)朗伯-比爾定律,某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL 式中:α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時(shí),α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì),則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。如果想測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類(lèi)胡蘿卜素的含量,只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A,并根據(jù)葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類(lèi)胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。在400-700nm的光輻射(PAR)是光合作用所需的最主要的能量。大部分葉片接受的光被吸收用來(lái)進(jìn)行光化學(xué)過(guò)程。然而,有一小部分的光從反應(yīng)中心以更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光重新發(fā)散出去,這些被重新發(fā)散出的光稱為葉綠素?zé)晒狻y(cè)量很簡(jiǎn)單,先將葉片預(yù)黑暗處理一段時(shí)間,然后再在飽和光強(qiáng)下暴露短暫的時(shí)間,測(cè)量這段時(shí)間內(nèi)熒光強(qiáng)度隨時(shí)間的變化的動(dòng)力學(xué)感應(yīng)曲線。曲線的形狀和曲線上重要的瞬時(shí)值可以用來(lái)指示環(huán)境脅迫對(duì)光合器官的損傷。通常,最有意義的參數(shù)是Fv/Fm,稱為光化學(xué)效率。
在現(xiàn)代,使用葉綠素含量測(cè)定儀,可以科學(xué)的進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)工作,避免了盲目生產(chǎn)造成的農(nóng)業(yè)損失,非常適合應(yīng)用于精準(zhǔn)農(nóng)業(yè)的發(fā)展中。
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